UFL1对小鼠胚胎干细胞分化的影响文献综述

一、 研究背景

干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞，根据干细胞所处的发育阶段不同分为胚胎干细胞和成体干细胞。

胚胎干细胞是由哺乳类动物着床前囊胚内细胞团在体外特定条件下培养和扩增所获得的一种多能性干细胞，具有发育的多能性和无限的自我更新能力，广泛应用于生物学领域的各项研究中。

由于胚胎干细胞的基本特征决定了可以通过在体外改变培养条件，将其诱导分化为不同类型的细胞，这使得胚胎干细胞有较高的研究应用价值，如应用于早期胚胎发育、干细胞疗法以及遗传疾病等领域。

泛素是一类真核细胞内广泛存在的小分子蛋白质，大小为76个氨基酸残基，泛素间可以通过酶促反应相互连接，进而介导靶蛋白降解，通过近年来对泛素的广泛研究发现，其除了具有降解蛋白质的作用以外，在细胞周期、代谢调节、信号传递以及DNA修复等众多环节发挥着重要的作用。

UFM1 (ubiquitin-fold modifier 1)是近年来发现的一种类泛素蛋白，它具有类似于泛素可以共价结合到靶蛋白上的修饰功能，这种现象称为ufmylation。目前已知 ufmylation 在内质网应激、细胞稳态等方面具有重要的作用，并与许多疾病相关。而基于已有的研究，UFM1 修饰系统只发现一个E1 (UBA5)、一个 E2 (UFC1)、一个E3(UFL1)以及两个底物蛋白ASC1和UFBP1。

胚胎干细胞由于其在体外的自我复制能力而被广泛用于基因功能的相关研究，本课题旨在探究UFL1基因与小鼠胚胎干细胞（mouse embryonic stem cell）mESC分化之间的关系，首先获得目的基因并与载体进行连接得到携带目的基因的重组子，接着转化入宿主菌，通过在原核表达系统中目的基因随细菌增殖而不断扩增的特性进行产物扩增，获得大量携带UFL1目的基因的重组子，再将其转入真核表达系统中进行过表达，最后检验过表达是否成功并对成功过表达UFL1基因的mESC进行相应检测，总结过表达UFL1基因对mESC分化的影响。

二、 实验内容

1. 获得目的基因