开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
研究方法:
|
仪器设备 |
高效液相色谱仪 |
||
|
色谱柱 |
Waters Symmetry C18柱（4.6mmtimes;150mm，5mu;m）或效能相当的色谱柱 |
||
|
波长（nm） |
256 |
流速(ml/min) |
1.0 |
|
柱温（℃） |
40 |
检测时间（min） |
30 |
|
进样量（mu;l） |
20 |
洗脱方式 |
梯度洗脱 |
|
流动相 |
A |
0.03mol/L甲酸铵溶液（用甲酸调节pH值至4.0plusmn;0.3） |
||
|
B |
甲醇-乙腈（2:1） |
|||
|
运行方法 |
时间（min） |
流动相A(%) |
流动相B(%) |
|
|
0 |
55 |
45 |
||
|
5 |
55 |
45 |
||
|
15 |
30 |
70 |
||
|
20 |
30 |
70 |
||
|
22 |
55 |
45 |
||
|
30 |
55 |
45 |
||
|
试剂和试药 |
甲酸铵、甲酸、甲醇、乙腈、纯化水 |
|||
|
溶液制备 |
空白溶剂：准确量取流动相A550ml与流动相B450ml，混匀，超声，即得 系统适用性溶液：精密称取杂质A、杂质B、杂质C、杂质F、杂质G、杂质H、杂质I、杂质J各约10mg，置20ml量瓶中，加溶剂适量超声处理使溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为各杂质贮备液；精密称取伏立康唑对照品25mg，置50ml量瓶中，加溶剂适量超声处理使溶解，加入各杂质贮备液0.5ml，加溶剂稀释至刻度，摇匀，即得； 供试品溶液：精密称取供试品约20mg，置20ml量瓶中，加溶剂超声处理使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得； 对照溶液：精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加溶剂超声处理使溶解，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。 |
|||
|
进样次序 |
|
|||
|
系统适用性要求 |
出峰顺序依次为杂质H、杂质A、杂质C、杂质G、杂质B、杂质I、伏立康唑、杂质J和杂质F，主峰与相邻杂质峰的分离度应不小于1.5，各已知杂质峰与相邻杂质峰的分离度应不小于1.0。 |
|||
|
测试标准 |
供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按加校正因子的自身对照法计算，杂质A、杂质B、杂质C均不得过0.15%，其他单个杂质不得过0.10%，总杂不得过0.5%。 |
|||
|
判断标准 |
测试样品，结果符合上述测试标准，则判定符合要求，否则判定不符合要求。 |
|||
验证目的：
HPLC法测定FLKZ原料药有关物质及其方法学验证
采用HPLC进行FLKZ原料药进行FLKZ原料药有关物质检测；按照各项指导原则要求完成方法学验证及验证报告的撰写
规范列举FLKZ原料药的有关物质检测HPLC方法；根据各项指导原则明确方法学验证的目的、要求；详细体现方法学验证的具体实验操作；如实记录各项试验的结果；科学论述各项试验的结果，并明确给出整套方法学验证结论
FLKZ有关物质分析方法为本公司对各国药典标准和注射用FLKZ进口注册标准（JX20150180）方法对比研究和条件优化后制定的有关物质方法，并对方法进行全面的验证，以确认此分析方法可满足FLKZ有关物质的检测要求
验证项目：
本验证项目包括专属性、溶液稳定性、检测限和定量限、线性和范围、准确度、进样精密度、重复性、中间精密度和耐用性等
文献综述：
验证总结表
|
项目 |
可接受标准 |
验证结果 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
专属性 |
（1）空白溶剂应不干扰测定； （2）系统适用性溶液中各杂质的保留时间与定位溶液峰的保留时间一致； （3）主峰与相邻杂质峰的分离度应不小于1.5，各已知杂质峰与相邻杂质峰的分离度应不小于1.0； （4）各强制降解条件下主成分峰与强制降解产物峰之间达到良好分离，主峰峰纯度应符合要求（匹配值ge;980/或纯度角小于纯度阈值），物料平衡值应在90%~110%之间。 |
（1）空白溶剂对检测无干扰； （2）系统适用性溶液中各杂质的保留时间与定位溶液峰的保留时间一致； （3）主峰与相邻杂质峰分离度为4.67，各已知杂质峰与相邻杂质峰之间最小分离度为1.94； （4）各强制降解条件下产生的降解杂质峰与主峰最小分离度为5.78，且降解杂质对已知杂质峰的检测无干扰，物料平衡值在96.74%~100.92%之间。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
溶液稳定性 |
在规定时间内，供试品溶液、标记供试品溶液中单个杂质与0h相比含量差值不得过0.05%，总杂差值不得过0.1%，均应无高于报告限（0.05%）的新杂质产生；对照溶液保留时间的RSD应不大于1%，主峰面积的RSD应不大于2%。 |
（1））对照溶液在室温放置35h内，各考察时间点主峰保留时间的RSD为0.25%，峰面积的RSD为1.8%，对照溶液在室温放置35h内稳定。 （2）供试品溶液室、标记供试品溶液室温放置35h内，均未产生新的超出报告限（0.05%）杂质，不同时间点各杂质的含量与0h杂质含量的差值在0.00%~0.02%范围内，总杂与0h的差值在0.00%~0.04%范围内，供试品溶液、标记供试品溶液在室温放置35h内稳定。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
检测限 |
信噪比（S/N）ge;3 |
各成分的检测限结果如下：
结果表明各成分检测限符合验证要求。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
定量限 |
（1）信噪比（S/N）ge;10； （2）6份定量限溶液，各杂质保留时间的RSD应不大于1%，峰面积的RSD应不大于10%； （3）定量限浓度不大于杂质报告限（0.05%）浓度。 |
各成分定量限结果如下：
各成分定量限浓度不大于样品浓度的0.05%，该方法灵敏度良好。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
线性和 范围 |
在一定浓度范围内，进样浓度与峰面积呈线性关系： （1）相关系数r不得小于0.990 （2）Y轴截距应在100%响应值的25%以内 （3）响应因子的RSD应不大于10% |
在定量限至限度浓度750%范围内，对9个浓度进行研究： 主成分及各杂质在定量限至限度浓度750%范围内，线性关系良好。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
相对校正因子 |
线性方程中，主成分的斜率除以杂质斜率，得到杂质的相对校正因子：
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
准确度 |
各浓度下的平均回收率均应在90%～108%之间，9个回收率数据的RSD应不大于10%。 |
各杂质在相当于限度浓度50%、100%、150%浓度水平下，回收率结果（n=9）如下：
结果表明该方法准确度良好。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
j精密度 |
进样精密度 |
对照溶液连续进样6次，主峰保留时间的RSD应不大于1 %，峰面积的RSD应不大于2%。 |
对照溶液连续进样6次，保留时间RSD为0.20%，峰面积的RSD为1.1%，表明仪器精密度良好。 |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
重复性 |
6份标记供试品溶液中单个杂质测定结果的极差不得过0.03%，总杂测定结果的极差不得过0.10%。 |
在供试品溶液中加入100%限度浓度的各杂质，同法配制6份，6份样品溶液中单个杂质的极差在0.00%~0.01%之间，总杂极差为0.02%，表明该方法重复性良好。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
中间精密度 |
12份标记供试品溶液中单个杂质测定结果的极差不得过0.05%，总杂测定结果的极差不得过0.10%。 |
不同的实验人员，在不同时间使用不用仪器测定，按照“重复性”项下样品配制方法配制6份标记供试品溶液，同法测定，12份标记供试品溶液中单个杂质的极差在0.00%~0.01%之间，总杂极差为0.03%，表明该方法中间精密度良好。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
耐用性 |
微调色谱条件： （1）系统适用性溶液中各个杂质峰之间及主成分峰和相邻杂质峰分离度应符合规定；（2）不同条件下标记供试品中各杂质测得值与原条件相比极差不大于0.05%，总杂与原始条件的差值不得过0.1%，则该方法在相应色谱参数下耐用。 |
当分析方法中流动相流速（0.9ml/min、1.1ml/min）、色谱柱柱温（38℃、42℃）流动相pH(3.7、4.3)、流动相A初始比例（50%、57%）以及色谱柱发生微小变化，各条件下系统适用性溶液中主成分峰和相邻杂质峰分离度均符合规定，各个标记供试品溶液中单个杂质含量与原始条件的差值均在0.00%~0.02%以内，总杂含量与原始条件的差值为0.04%，符合验证要求，该方法耐用性良好。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
总结
FLKZ是三唑类抗真菌药氟康唑的衍生物 ,具有抗菌谱广、抗菌效力强等特点,通过抑制 14 alpha;-去甲基酶 ,对许多致病酵母菌和丝状真菌都有效, 尤其对曲霉菌具有杀菌作用 ,同时对耐氟康唑的克鲁斯念珠菌也非常有效。FLKZ由美国辉瑞公司研究开发,其粉针剂于 2002 年 8 月在美国首次上市 ,更好地满足了市场需要。
FLKZ有关物质分析方法为本公司对各国药典标准和注射用FLKZ进口注册标准（JX20150180）方法对比研究和条件优化后制定的有关物质方法，并对方法进行全面的验证，以确认此分析方法可满足FLKZ有关物质的检测要求。
参考文献：
- 王黎,李华.高效液相色谱法测定注射用FLKZ的含量[J].西北药学杂志,2007(02):51-52.
- 李学娟,刘四喜,陈泽彬,魏红,杨卫国,温鹏强.高效液相色谱法测定人血浆中FLKZ的浓度[J].中国药房,2017,28(32):4499-4502.
- 王幼林,周露露,杨凌飞.HPLC法测定人血浆中FLKZ的浓度[J].中国药房,2015,26(32):4501-4503.
- 许明哲,黄宝斌,杨青云,田学波,白东亭,王佑春.分析方法确认内容介绍[J].药物分析杂志,2015,35(01):183-189.
- 糜志远,石磊,张迎庆.高效液相色谱法测定FLKZ胶囊含量研究[J].湖北工业大学学报,2011,26(05):47-49.
- 李皓琳.HPLC法测定FLKZ乳剂中FLKZ的含量[J].中国医药指南,2013,11(23):462-463.
- 王晓玲.HPLC法测定抗真菌药FLKZ的有关物质[J].西南民族大学学报(自然科学版),2004(05):595-597.
- 刘海林,袁红梅,王虎,刁俊林,周春巧,丁晓莉,张雪林,董志,王松.氟康唑、酮康唑、伊曲康唑和FLKZ上市后不良反应信号的挖掘与分析[J].中国药房,2020,31(09):1118-1123.
- 丁艳艳.FLKZ联合不同剂量泼尼松治疗变应性支气管肺曲霉病疗效观察[J].新乡医学院学报,2020,37(04):382-385.
- 吴耿锋,金泉泉,龚珊.化学原料药的分析方法验证、转移与确认[J].化工设计通讯,2020,46(03):245 262.
开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
研究方法:
课题毕业论文、文献综述、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
