四环类药物质量研究文献综述

四环类药物分子结构中具有共同的氢化骈四苯环，属广谱抗生素，即四环素类抗生素。国内应用品种有四环素、土霉素、金霉素、多西环素、美他环素和米诺环素。前三种系天然品；后三种是人工半合成品，又称新四环素类。四环素类抗生素既有抗生作用又有抗炎作用,作用广泛、疗效可靠，从上世纪40年代发现至今，已经普遍应用于各种感染性疾病和不少非感染性疾病,取得了很好的疗效。但是, 由于此类抗生素的副作用较多, 如果使用不当或滥用, 往往会加重、加速毒性反应的发生, 严重者可以致死。四环素类不良反应主要有：肾功能障碍、胃肠反应、对牙齿和骨髓的副作用、脂肪肝、胎儿致畸、过敏反应、二重感染、对机体的免疫抑制作用。其中肾功能障碍可危及生命。

理想的新四环素必须具备:较高的抗菌活性,抗菌谱较广,较少有第二代耐药,较低的副反应(主要指在骨骼和牙齿中积聚得较少些, 以便儿童使用)。口服吸收更好些以及有更好的药代动力学性质(指口服吸收时,钙、镁离子和食物对药物的千扰较低些)。这也是我们进行此课题研究的目的和意义所在，提高四环类药物质量标准，最大限度减少毒副作用的发生。同时对于高效液相色谱法和质谱法有更深入和实际的理解，探索实验最佳条件。

在四环素生产过程中, 会形成一定量的脱水四环素 、4-差向四环素、脱水差向四环素及其它的四环素类物质, 这些杂质被带入成品四环素中影响其质量。在成品四环素保存过程中,可见到药品外观颜色逐渐加深,其中所含的脱水四环素、4-差向四环素、脱水差向四环素等杂质的含量亦随之增加,从而导致药品质量下降,抗菌活性降低,毒副作用显著增加。四环素类抗生素的含量测定方法有微生物法、紫外法、高效液相色谱法、直接电位法、荧光光度法、酶联免疫检测方法等。以下简介几种：

动力学分光光度法：在碱性介质中,四环素将紫红色的高锰酸钾还原成绿色的锰酸钾。该体系在526 nm和608 nm分别有吸收谷和吸收峰,以这两个波长为测量波长,以360 s为反应时间,四环素的线性范围为0.5 - 7.5 mgL - 1 ,检测限为0.23mgL - 1。将该方法具有较好的检测限和灵敏度。

　 薄层色谱法( TLC) :薄层色谱法( TLC) 分为正相薄层色谱(NP - TLC) 和反相薄层色谱(RP - TLC) 。NP - TLC主要使用硅藻土、硅胶和纤维素作为吸附层,而RP - TLC 的溶剂体系中一般都含有草酸,用以消除由于四环素与金属离子发生鳌合产生的影响。上述两种方法都可以实现8种四环素的分离。为了测定薄层板上的四环素,可以使用氯化镁、氯化铁、五氯化锑、硫酸、重氮化-p-硝基苯胺、改进的Sakaguchi 试剂、diphenylpicrylhydrazyl试剂及重氮盐作为显色试剂,然后观察产生的颜色,均可以达到很高的检测灵敏度。

微生物法：目前公认而又广泛应用的测定抗生素的方法,也是我国药典中引用的方法。它根据对抗生素敏感的实验菌,在适当条件下所产生的抑菌圈大小和药物浓度成比例的关系设计而成。此法虽然原理及操作简单,但是测定所花时间太长、灵敏度不高。

高效毛细管电泳法：采用高效毛细管电泳法可将四环素、4- 差向四环素、脱水四环素、脱水差向四环素、二甲胺四环素、去甲基金霉素及土霉素完全分离, 并测定四环素中杂质。此方法简便、高效、快速。

高效液相色谱法：(HPLC) 高效液相色谱法是最主要的色谱分析方法, 此种方法的灵敏度、特异性都非常高, 可以准确地定性、定量。可测定复方四环素片中盐酸四环素的含量。采用ODS色谱柱，流动相用氨试液调节PH至8.3的0.1mol.L-1的草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2 mol.L-1的磷酸氢二铵（68：27：5），流速1ml.min-1,柱温：35℃，检测波长：280nm。进样量：10uL。